FLASH递送系统技术平台

技术平台简介

FLASH递送系统技术平台——广谱、高效、低毒

基因编辑技术的核心瓶颈之一在于递送——如何高效、低毒地将编辑工具递送至目标细胞,尤其是干细胞、原代细胞、免疫细胞等“难转染”细胞类型。
FLASH递送系统是艾迪基因自主研发的广谱型基因编辑递送平台。基于优化的蛋白/核酸共递送载体,FLASH系统实现了RNP复合物与Donor DNA的同时递送,在保持低细胞毒性的同时,显著提升编辑效率。
截至目前,FLASH系统已成功验证覆盖400+细胞系,包括iPSC、hESC、类器官、免疫细胞等传统难转染细胞,广泛应用于基因敲除、点突变、基因敲入三大核心场景。
核心技术优势

广谱适用范围:
已成功覆盖400余种细胞系,尤其擅长iPSC、hESC、类器官及免疫细胞等传统技术难以转染的细胞类型;

超高编辑效率:
53%的细胞系敲除效率突破80%,点突变Pool效率高达98%,基因敲入效率达到88%,全面超越传统基因编辑技术;
极低细胞毒性:
采用创新蛋白递送系统,彻底规避DNA质粒导致的免疫原性反应与随机整合风险,确保细胞存活率保持在90%以上;
多元化应用场景:
全面覆盖基因敲除(Flash-KO)、精准点突变(Flash-PE7)及基因敲入(Flash-KI)三大核心应用场景,满足不同研究需求。
FLASH vs. 传统递送方法:全面领先
对比维度 病毒载体(慢病毒/AAV) 电转 脂质体转染 FLASH 递送系统
广谱适用 受限:iPSC、原代T细胞效率低;AAV容量小 普遍适用但损伤大,神经元等效率低 常规细胞系尚可,干细胞/悬浮细胞极低 已验证400+细胞系,涵盖iPSC、hESC、类器官、免疫细胞
周期 慢病毒包装2-3周;AAV生产更久 数小时 数小时 即用型蛋白复合物,无需病毒包装,数小时完成递送
编辑效率 敲入效率低(HDR<10%);可能沉默 敲除30-70%,敲入<20% 敲除30-70%,敲入<10% 敲除:53%细胞系>80%;点突变:pool效率98%;敲入:提升5-7倍(293T达88%)
细胞毒性 低至中等,随机整合有致突变风险 高:电穿孔死亡率30-50% 中等 低:转染后细胞活力>90%
是否依赖分裂 慢病毒依赖,AAV不依赖 敲入依赖HDR(需分裂) 敲入依赖HDR 点突变(PE7)不依赖分裂;敲入配合NHEJ抑制可在非分裂细胞中提升效率
是否需要筛选 常需抗性筛选(1-2周) 常需筛选 常需筛选 多个靶点无需筛选即可获高纯度池(如293T敲入88% pool)
随机整合风险 高:病毒整合至宿主基因组 无(瞬转) 无(瞬转) 无:蛋白/RNA瞬时表达
服务类型

标准服务类型

服务类型 技术方案 适用场景 交付内容 周期
基因敲除服务 FLASH-RNP递送 + UP.SIGHT单克隆筛选 常规及难转染细胞(iPSC、类器官、免疫细胞等)基因敲除 纯合单克隆细胞系(≥2株)+ 测序验证报告 8-12 周
点突变服务 FLASH-PE7先导编辑 单碱基替换、小片段插入/删除;适用于非分裂细胞 纯合点突变单克隆细胞系 + 测序验证报告

10-14

基因敲入服务 FLASH-KI(RNP+Donor共递送)+ NHEJ抑制 报告基因敲入、标签插入、条件性敲入 纯合敲入单克隆细胞系 + 测序验证报告 10-14 周
单细胞基因编辑服务 UP.SIGHT单细胞铺板 + CFM促克隆 + FLASH-RNP原位编辑 一步获得单克隆敲除/点突变细胞系,无需多轮筛选 单细胞来源纯合单克隆细胞系 + 全程质控报告 8-10 周

定制化服务

定制类型 说明 周期 备注
大片段敲入 >4kb 片段定点整合 (如全长基因、调控元件) 13-16周 需评估 Donor 设计和细胞耐受性
高通量编辑 96 孔板并行编辑 (≥48 个靶点) 10-12周 适用于 CRISPR 文库筛选
难转染细胞专项 原代细胞、神经元、类器官等特殊细胞类型 12-16周 需预实验优化参数

市场统一口径数据(服务能力总结)

指标 数据
已验证细胞系 400+
基因敲除项目成功率 >95%(常规细胞系);>80%(难转染细胞)
点突变项目成功率 83%(整体)
敲入项目成功率 70-90%(视难度)
最快交付周期 8周(单细胞编辑/常规敲除)
累计交付案例 3000+(敲除、点突变、敲入合计)
成功案例
  1. 案例一:部分细胞系高效敲除数据展示

  2. 为验证FLASH-RNP系统的广谱适用性与高效性,我们选取了近百株不同组织来源、不同物种的细胞系进行基因敲除测试,涵盖肿瘤细胞、正常永生化细胞、干细胞、免疫细胞、类器官等类型。
结果显示:
53% 的细胞系敲除效率 >80%
88% 的细胞系敲除效率 >30%
即使在iPSC、hESC、原代T细胞、类器官等传统难转染细胞中,敲除效率也显著优于传统方法。


案例二:iPSC (CIITA、B2M) 双等位基因敲除(敲除场景)

挑战:iPSC难转染,传统方法效率<5%

方案:采用FLASH-RNP共递送两个sgRNA

成果:编辑效率64%+75%,3周获得纯合双敲除单克隆株,多能性未受影响

具有代表性的真实案例展示(设计逻辑+实验流程+交付过程+售后)

案例三:hESC TH基因C端敲入EGFP(敲入场景)

挑战:hESC对DNA损伤敏感,传统敲入效率<5%

方案:采用FLASH-KI + NHEJ抑制

成果:敲入效率20%,获得稳定传代报告细胞系,核型正常,多能性未受影响

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