荧光标签敲入
通过CRISPR/Cas9在内源基因位点精准敲入荧光标签,实现蛋白在天然表达背景下的实时可视化与动态追踪。相比质粒过表达系统,Fluorescent Tag Knock-in 可避免表达量失真与定位偏差,适用于高精度成像与定量分析。基于 FLASH-KI™ 技术平台,实现 Cas9 RNP 与 Donor 模板的高效同步递送,在保证≥90%细胞活率的同时,提高敲入效率与稳定性。
服务详情
| 细胞类型 | 各种细胞类型,包括肿瘤细胞系、正常体细胞系、干细胞等。 |
|---|---|
| 服务类型 | 单基因荧光标签敲入(PEGFP、mCherry、mNeonGreen、TagRFP等),双标签组合(如 EGFP + FLAG) |
| 交付标准 | 单克隆细胞1株、亲本细胞株(2管/株,1×10^6细胞/管) |
| 周期/价格 |
|
为什么选择我们的Knock-in Tag服务?
核心性能指标
| 指标 | 数值 |
|---|---|
| Knock-in效率 | 45% – 88% |
| 细胞活率 | ≥90% |
| 项目成功率 | 83% |
| 已完成项目 | 100+ |
服务优势

内源表达,真实反映蛋白行为
保留启动子与调控元件
避免过表达伪影
避免过表达伪影

HDR效率增强
搭配 KI Enhance Drug
转染后约7天达到效率峰值
转染后约7天达到效率峰值

高效同步递送(FLASH-KI™)
Cas9RNP+Donor同步递送
无需电转/脂质体
转染效率显著提升
无需电转/脂质体
转染效率显著提升

低损伤高适配
细胞活率≥90%
适用于:
• 肿瘤细胞
• 干细胞(iPSC)
• 免疫细胞
适用于:
• 肿瘤细胞
• 干细胞(iPSC)
• 免疫细胞
Tag类型及应用:
| 标签 | PEGFP、mCherry、mNeonGreen、TagRFP |
|---|---|
| 敲入位置 | N端 / C端 / 内部loop |
| 应用场景 | 活细胞成像蛋白、共定位分析 、FACS分选 |
| 特点 | 内源表达,荧光强度与表达量一致 |
服务流程

成功案例
HEK293T细胞GAPDH基因EGFP-Tag融合敲入
目标:在GAPDH基因C端敲入EGFP标签,用于实时追踪活细胞糖酵解通量。
方案:Flash-KI™递送Cas9 RNP + 含EGFP序列及同源臂的Donor载体,配合 KI Enhance Drug。
结果:多克隆细胞敲入效率88%,成功获得稳定表达细胞。
方案:Flash-KI™递送Cas9 RNP + 含EGFP序列及同源臂的Donor载体,配合 KI Enhance Drug。
结果:多克隆细胞敲入效率88%,成功获得稳定表达细胞。


88% EGFP-KI in HEK293T cell pool by Flash-KI
Advantage and Characteristic
Optimazied Strategy
We have create a unique sgRNA Design Logic
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FAQ
是否支持多颜色标记?
支持,如:EGFP + mCherry
是否支持难转染细胞?
支持,FLASH技术在敏感细胞中表现稳定
荧光标签会影响蛋白功能吗?
- 优先选择C端插入
- 使用linker减少结构影响
- 可提供对照设计
可以用于活细胞成像吗?
可以,适用于长时间动态追踪