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荧光标签敲入

通过CRISPR/Cas9在内源基因位点精准敲入荧光标签,实现蛋白在天然表达背景下的实时可视化与动态追踪。相比质粒过表达系统,Fluorescent Tag Knock-in 可避免表达量失真与定位偏差,适用于高精度成像与定量分析。基于 FLASH-KI™ 技术平台,实现 Cas9 RNP 与 Donor 模板的高效同步递送,在保证≥90%细胞活率的同时,提高敲入效率与稳定性。

服务详情

细胞类型 各种细胞类型,包括肿瘤细胞系、正常体细胞系、干细胞等。
服务类型 单基因荧光标签敲入(PEGFP、mCherry、mNeonGreen、TagRFP等),双标签组合(如 EGFP + FLAG)
交付标准 单克隆细胞1株、亲本细胞株(2管/株,1×10^6细胞/管)
周期/价格   在线咨询

为什么选择我们的Knock-in Tag服务?

核心性能指标

指标 数值
Knock-in效率 45% – 88%
细胞活率 ≥90%
项目成功率 83%
已完成项目 100+

服务优势

内源表达,真实反映蛋白行为
保留启动子与调控元件
避免过表达伪影
HDR效率增强
搭配 KI Enhance Drug
转染后约7天达到效率峰值
高效同步递送(FLASH-KI™)
Cas9RNP+Donor同步递送
无需电转/脂质体
转染效率显著提升
低损伤高适配
细胞活率≥90%
适用于:
• 肿瘤细胞
• 干细胞(iPSC)
• 免疫细胞

Tag类型及应用:

标签 PEGFP、mCherry、mNeonGreen、TagRFP
敲入位置 N端 / C端 / 内部loop
应用场景 活细胞成像蛋白、共定位分析 、FACS分选
特点 内源表达,荧光强度与表达量一致

服务流程

成功案例

目标:在GAPDH基因C端敲入EGFP标签,用于实时追踪活细胞糖酵解通量。
方案:Flash-KI™递送Cas9 RNP + 含EGFP序列及同源臂的Donor载体,配合 KI Enhance Drug。
结果:多克隆细胞敲入效率88%,成功获得稳定表达细胞。

88% EGFP-KI in HEK293T cell pool by Flash-KI

Advantage and Characteristic

Optimazied Strategy
We have create a unique sgRNA Design Logic
Optimazied Strategy
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Optimazied Strategy
We have create a unique sgRNA Design Logic
Optimazied Strategy
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FAQ

是否支持多颜色标记?
支持,如:EGFP + mCherry
支持,FLASH技术在敏感细胞中表现稳定
  • 优先选择C端插入
  • 使用linker减少结构影响
  • 可提供对照设计
可以,适用于长时间动态追踪

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