AAVS1 定点敲入试剂盒

货号 : EDNCP-001

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数量

* 仅供科研使用,不适用于人体或动物,包括临床、治疗或诊断用途。

产品概述

本试剂盒依托艾迪基因自主开发的Flash-RNP™ 递送系统,整合AAVS1位点特异性同源重组模板(AAVS1-FLASH-Donor) 与新型KI增强剂(KI Enhancer),可在人类基因组AAVS1安全港位点实现高效率高保真的外源基因定点敲入。系统基于RNP复合物瞬时递送,兼顾编辑效率与细胞安全性,有效规避质粒或病毒载体带来的随机整合与脱靶风险。试剂盒提供从供体设计、编辑递送到阳性筛选的全流程优化方案,尤其适用于定点报告基因标记、功能基因稳转株构建、以及可诱导表达系建立等应用场景。整体操作流程精简,可在一周内完成阳性多克隆获取,编辑效率显著高于传统HDR(同源定向修复)策略,为您的基因工程研究提供高效、可靠的一站式工具。

储存条件及有效期

·RNP 复合物与 Donor:-80℃ 保存,有效期 6 个月,避免反复冻融。
·KI enhancer drug:-20℃ 保存,有效期 12 个月。
·建议根据使用次数进行分类,避免反复冻融影响产品活性。

产品规格

产品编号 组分 规格 备注
EDNCP-001 递送载体-RNP 复合物(sgRNA) 150 μL 等量使用
同源重组模板(Donor) 150 μL 等量使用
KI enhancer drug 1 25 μL 1000× 储存液
KI enhancer drug 2 25 μL 1000× 储存液

注意事项

·建议使用生长状态良好的细胞,避免使用老化或污染细胞。

·AAVS1-Flash-RNP 与 AAVS1-Flash-Donor 避免反复冻融,建议分装保存。
·KI enhancer drug 为 1000× 浓缩液,请按比例稀释使用。
·AAVS1 位点敲入说明:AAVS1 位点位于人 19 号染色体 PPP1R12C 基因的内含子区域,在该位点敲入外源基因不会影响内源基因功能,可实现外源基因的长期稳定表达。Donor 设计已针对 AAVS1 位点进行优化,确保同源臂序列的特异性与重组效率。
·使用该产品发表文章时,请标注我司名称:Guangzhou Editgene Co., Ltd, China, CRISPR RNP KI kit (CAS: EDKI-K01)

产品背景

1.为什么选择 AAVS1 安全港位点?
AAVS1(又名 PPP1R12C)位点位于人第 19 号染色体(19q13.42),是一个经过充分验证的基因组“安全港”位点1,2。该位点具有以下核心优势:
① 开放染色质结构:AAVS1 位点处于转录活跃区域,周围染色质呈开放构象,能够确保插入的外源基因实现长期、稳定表达。
② 无表型影响:在该位点插入外源基因不会干扰内源基因的正常功能,已被证明对细胞无不良表型影响。
③ 广泛应用验证:AAVS1 位点已被广泛应用于稳转细胞系构建、报告基因标记、基因过表达等研究场景。
④ 避免随机整合风险:定点整合至 AAVS1 位点可避免外源基因随机插入基因组带来的潜在安全风险。
因此,AAVS1 位点是基因敲入和稳转细胞系构建的理想靶点。
2.FLASH-KI 技术平台简介
本试剂盒基于艾迪基因自主研发的 FLASH-KI 高效定点整合平台,整合了两大核心技术:
核心技术一:FLASH-KI 共递送系统 —— 将 RNP 复合物与 Donor 模板同步递送至细胞内,提高修复模板与编辑位点的时空匹配度,大幅简化操作流程。该递送方式为蛋白递送,避免了 DNA 质粒带来的免疫原性与随机整合风险,Flash递送系统已覆盖 400+ 细胞系验证。
核心技术二:KI enhancer drug(NHEJ 抑制剂) —— 在 CRISPR 介导的 DNA 双链断裂修复中,通过短暂、可逆地抑制 NHEJ 修复途径,迫使细胞优先选择 HDR 同源重组修复,从而将敲入效率提升 5-7 倍。
1 Ahmed, A. et al. Human Genome Safe Harbor Sites: A Comprehensive Review of Criteria, Discovery, Features, and Applications. Cells 15, doi:10.3390/cells15010081 (2026).
2 Hayashi, H., Kubo, Y., Izumida, M. & Matsuyama, T. J. S. r. Efficient viral delivery of Cas9 into human safe harbor. 10, 21474 (2020).
* 研究用途免责声明:本内容基于公开的研究数据、生物信息学资源及计算分析生成,仅供研究参考。
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