RNA快速恒温扩增试剂盒(荧光型)是基于室温恒温核酸快速扩增技术开发的,适用于实验室级RNA扩增及其他需要RNA扩增的检测应用。该试剂盒通过加入模板特异性分子探针,利用荧光检测设备实时监测目标片段扩增过程。
* 仅供科研使用,不适用于人体或动物,包括临床、治疗或诊断用途。
产品原理
本试剂盒基于一种常温恒温核酸快速扩增技术:在常温恒温下(一般为39℃~42℃),反转录酶利用特异性引物DNA和模板RNA合成cDNA链,在辅助蛋白和单链结合蛋白SSB的帮助下,重组酶和引物形成蛋白/单链核苷酸的复合体Rec/ssDNA,进行同源搜索并结合目的同源域,在同源位置形成D-loop区域并开始进行链交换;伴随着重组酶从复合体上解离,聚合酶也结合到引物的3’末端,开始链的延伸。同时依赖核酸外切酶的作用,加入根据模板设计的特异的分子探针,使用荧光监测设备能实现对目标片段扩增过程的实时监控。

产品优势及特点
1. 本试剂盒具有灵敏度高、特异性强、反应时间短(仅需20 min)等优点,反应组分为干粉状态,操作简便,易于保存。
2. 可适用于各种品牌的荧光定量PCR仪,恒温荧光扩增仪器等荧光检测设备。
应用方向

试剂盒组分
| 组成 | 含量 |
| A buffer | 1.6 mL×1 管 |
| B buffer | 150 μL×1 管 |
| 试剂 | 48 份 |
| 使用说明书 | 1 份 |
体系配制
| 组分 | 体积 (μL) |
| A buffer | 29.4 |
| 上游引物 (10 μM) | 2 |
| 下游引物 (10 μM) | 2 |
| 探针 (10 μM) | 0.6 |
| ddH2O and RNA 模板 | 13.5 |
| B buffer | 2.5 |
| 总体积 | 50 |
反应条件
恒温42 ºC;每30 s采集一次FAM通道(信号采集通道的选择与荧光探针设计一致)荧光值;反应时间20 min。
储存条件
1.运输温度:≤ 20 ºC的恒温环境;
2.储存条件:储存温度 ≤ -20 °C(± 5 °C)恒温环境,避光保存,避免重压、反复冻融;
3.产品有效期:14个月;
4.生产日期见外包装。
* 研究用途免责声明:本内容基于公开的研究数据、生物信息学资源及计算分析生成,仅供研究参考。